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ELISA洗板问题:开启问答模式
点击次数:600 发布时间:2017-05-05

    相信很多同学在ELISA实验过程中都有遇到过一些棘手的问题,就在4月末,我公司接到一客户李老师的,说希望我公司技术员帮忙指导一下。吴把李老师的问题向技术反应后,我司技术员当即打了,技术了解到李老师的问题来自于洗板。问题如下:

问题一:说明书上说洗板时要把孔里的水甩干,可我做的时候,无论我怎么拍,孔底还是有残留液体,请问这对试验有没有影响?或着有没有别的什么好的办法可以解决这个问题?
答:有一定的影响.尤其二抗反应后洗涤不好,会出现非特异.ELISA试验中洗涤是关键.尽可能甩干,而且尽量少拍,不一定每次都很干,但是zui后一次洗涤要尽量干.洗涤中另一个值得注意的是尽量不要出气泡. 如果有条件的话,可用洗板机。

问题二:什么才叫封闭好了呢?有没有什么标准?
答:一般用1%BSA,150μl,37度,2h,如果还有非特异反应的话,可能有其他原因,比如加样时溅到了壁上或有气泡,洗涤不充分,二抗浓度过高,封闭物不合适以及反应条件是否得当等。

问题三:1%bsa,你是用什么稀释的,我用过pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀释,结果封闭的效果都不怎么明显,与不封闭差不多.
答:1%BSA用PBS稀释就可以了。还有就是要注意你的操作,背景高不一定是封闭的问题。

    在我公司技术员的指导下,李老师相继完成了他的实验,并且实验效果也取得了预期的理想。李老师对我司的产品以及服务感到非常不错。并表示以后有实验还会继续选择我司跟我司合作。在此,我司对李老师也表示感谢,承诺将一直为客户提供zui的试剂盒跟服务!

 

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